Хемореактомный анализ молекул цитруллина
и малата
и малата
клинический пример
Торшин И.Ю.1, Громова О.А.2, Федотова Л.Э.2, Громов А.Н.3, Рудаков К.В.1
1ФГБОУ ВО «Московский физико-технический институт», Долгопрудный, Россия;
2ФГБОУ ВО «Ивановская государственная медицинская академия» Минздрава России, Иваново, Россия;
3ФГБУ «Федеральный исследовательский центр «Информатика и управление» РАН, Москва, Россия
1141700, Московская область, Долгопрудный, Институтский пер., 9; 2153000, Иваново, Шереметевский пр., 8;
3119333, Москва, ул. Вавилова, 44/2
1ФГБОУ ВО «Московский физико-технический институт», Долгопрудный, Россия;
2ФГБОУ ВО «Ивановская государственная медицинская академия» Минздрава России, Иваново, Россия;
3ФГБУ «Федеральный исследовательский центр «Информатика и управление» РАН, Москва, Россия
1141700, Московская область, Долгопрудный, Институтский пер., 9; 2153000, Иваново, Шереметевский пр., 8;
3119333, Москва, ул. Вавилова, 44/2
Цитруллина малат способствует обезвреживанию аммиачных эндотоксинов за счет участия в цикле мочевины, необходим для биосинтеза аргинина. Показаниями для назначения цитруллина малата являются функциональная астения, астенический синдром, переутомление, повышенная усталость, реабилитация в период выздоровления после перенесенных заболеваний.
Цель исследования – провести моделирование биологических свойств цитруллина малата.
Материал и методы. Для данной молекулы получены достоверные оценки более 2500 биологических активностей и проведено сравнение с контрольными молекулами – ацетилкарнитином и мельдонием.
Результаты и обсуждение. Полученные при хемореактомном моделировании данные позволяют предположить существенные отличия между фармакологическими эффектами цитруллина малата и контрольными молекулами. Малат-анион в составе малата цитруллина значимо повышает всасывание молекул цитруллина в желудочно-кишечном тракте независимо от кислотности желудка. Цитруллина малат улучшает всасывание бикарбонат-аниона в почках, что способствует преодолению ацидоза. Результаты хемореактомного моделирования указывают на антидепрессивные, анксиолитические, противовоспалительные свойства цитруллина малата, что может вносить существенный вклад в развитие противоастенического и детоксикационного эффекта препарата. Цитруллина малат также может проявлять антикоагулянтный, антивазопрессорный, гипогликемический, антигиперхолестеринемический и антибактериальный эффект. Эти свойства цитруллина малата могут способствовать скорейшему восстановлению пациентов после астении или интенсивных физических нагрузок по сравнению с контрольными молекулами (мельдоний, ацетилкарнитин).
Заключение. Полученные результаты соответствуют имеющимся экспериментальным и клиническим данным и указывают на перспективные направления терапевтического применения цитруллина малата.
Ключевые слова: цитруллина малат; ацетилкарнитин; мельдоний; хемореактомное моделирование; биоинформатика.
Контакты: Ольга Алексеевна Громова; unesco.gromova@gmail.com
Для ссылки: Торшин ИЮ, Громова ОА, Федотова ЛЭ и др.
Хемореактомный анализ молекул цитруллина и малата. Неврология, нейропсихиатрия, психосоматика. 2017;9(1):
Цель исследования – провести моделирование биологических свойств цитруллина малата.
Материал и методы. Для данной молекулы получены достоверные оценки более 2500 биологических активностей и проведено сравнение с контрольными молекулами – ацетилкарнитином и мельдонием.
Результаты и обсуждение. Полученные при хемореактомном моделировании данные позволяют предположить существенные отличия между фармакологическими эффектами цитруллина малата и контрольными молекулами. Малат-анион в составе малата цитруллина значимо повышает всасывание молекул цитруллина в желудочно-кишечном тракте независимо от кислотности желудка. Цитруллина малат улучшает всасывание бикарбонат-аниона в почках, что способствует преодолению ацидоза. Результаты хемореактомного моделирования указывают на антидепрессивные, анксиолитические, противовоспалительные свойства цитруллина малата, что может вносить существенный вклад в развитие противоастенического и детоксикационного эффекта препарата. Цитруллина малат также может проявлять антикоагулянтный, антивазопрессорный, гипогликемический, антигиперхолестеринемический и антибактериальный эффект. Эти свойства цитруллина малата могут способствовать скорейшему восстановлению пациентов после астении или интенсивных физических нагрузок по сравнению с контрольными молекулами (мельдоний, ацетилкарнитин).
Заключение. Полученные результаты соответствуют имеющимся экспериментальным и клиническим данным и указывают на перспективные направления терапевтического применения цитруллина малата.
Ключевые слова: цитруллина малат; ацетилкарнитин; мельдоний; хемореактомное моделирование; биоинформатика.
Контакты: Ольга Алексеевна Громова; unesco.gromova@gmail.com
Для ссылки: Торшин ИЮ, Громова ОА, Федотова ЛЭ и др.
Хемореактомный анализ молекул цитруллина и малата. Неврология, нейропсихиатрия, психосоматика. 2017;9(1):
Рацион современного человека зачастую перегружен белковой пищей. Распад белков в организме приводит к по- вышенной нагрузке на органы, отвечающие за выведение азотистых «шлаков» (печень, почки). Повышенные концен- трации продуктов деградации белков стимулируют эндотелиальное воспаление, аллергические реакции и в конечном
счете приводят к хронической эндотоксикации организма и астении.
При терапии таких пациентов врач сталкивается сразу с несколькими проблемами. Во-первых, гепатоциты перегружены вследствие необходимости инактивации азотистых «шлаков» и их выведения. Во-вторых, нефроциты и эпителий канальцев почек страдают из-за необходимости дилюции (разведения) эндотоксинов (в первую очередь аммиачных). В-третьих, перегруженность систем выведения приводит к тому, что уровень эндоксинов прогрессивно нарастает в различных жидких средах организма: в крови, лимфе, цереброспинальной и внутрисуставной жидкости и др.
В результате накопления эндотоксинов в жидкостях организма происходят негативные сдвиги в работе скелетной мускулатуры, кардиомиоцитов, клеток иммунной и нервной систем и формируются условия для возникновения астении, подавленного настроения (вплоть до депрессивных состояний). В условиях эндотоксикации также нарушается иммунитет, развивается системное воспаление, повышается риск тромбообразования.
Поэтому фармакологическая поддержка таких пациентов должна быть направлена не только на элиминацию эндотоксинов белкового происхождения, но и на реабилитацию других пострадавших систем организма (прежде все-
го, нервной, кардиоваскулярной и иммунной). Заметим, что назначение пациенту многочисленных препаратов, каждый из которых решает какую-то одну из перечисленных проблем (так называемая полипрагмазия), чревато много- численными побочными эффектами. Поэтому для лечения эндотоксикационной астении желательно, чтобы один пре- парат мог поддерживать реабилитацию всех пострадавших систем. Одним из таких препаратов является стимол1, дей-
ствующим началом которого является цитруллина малат.
Аминокислота L-цитруллин (от лат. citrullus – арбуз) синтезируется из орнитина и карбамоилфосфата в цикле мочевины. В организме L-цитруллин также может синтезироваться из L-аргинина и, наоборот, при необходимости L-аргинин синтезируется из L-цитруллина. L-цитруллин (далее – цитруллин) превращается в аргинин посредством ферментов аргининосукцинат синтетазы (ген ASS1) и аргининосукцинат лиазы (ген ASL).
счете приводят к хронической эндотоксикации организма и астении.
При терапии таких пациентов врач сталкивается сразу с несколькими проблемами. Во-первых, гепатоциты перегружены вследствие необходимости инактивации азотистых «шлаков» и их выведения. Во-вторых, нефроциты и эпителий канальцев почек страдают из-за необходимости дилюции (разведения) эндотоксинов (в первую очередь аммиачных). В-третьих, перегруженность систем выведения приводит к тому, что уровень эндоксинов прогрессивно нарастает в различных жидких средах организма: в крови, лимфе, цереброспинальной и внутрисуставной жидкости и др.
В результате накопления эндотоксинов в жидкостях организма происходят негативные сдвиги в работе скелетной мускулатуры, кардиомиоцитов, клеток иммунной и нервной систем и формируются условия для возникновения астении, подавленного настроения (вплоть до депрессивных состояний). В условиях эндотоксикации также нарушается иммунитет, развивается системное воспаление, повышается риск тромбообразования.
Поэтому фармакологическая поддержка таких пациентов должна быть направлена не только на элиминацию эндотоксинов белкового происхождения, но и на реабилитацию других пострадавших систем организма (прежде все-
го, нервной, кардиоваскулярной и иммунной). Заметим, что назначение пациенту многочисленных препаратов, каждый из которых решает какую-то одну из перечисленных проблем (так называемая полипрагмазия), чревато много- численными побочными эффектами. Поэтому для лечения эндотоксикационной астении желательно, чтобы один пре- парат мог поддерживать реабилитацию всех пострадавших систем. Одним из таких препаратов является стимол1, дей-
ствующим началом которого является цитруллина малат.
Аминокислота L-цитруллин (от лат. citrullus – арбуз) синтезируется из орнитина и карбамоилфосфата в цикле мочевины. В организме L-цитруллин также может синтезироваться из L-аргинина и, наоборот, при необходимости L-аргинин синтезируется из L-цитруллина. L-цитруллин (далее – цитруллин) превращается в аргинин посредством ферментов аргининосукцинат синтетазы (ген ASS1) и аргининосукцинат лиазы (ген ASL).
1Стимол (ООО «БИОКОДЕКС», Франция).
В форме ионной соли с яблочной кислотой (цитруллина малат) цитруллин используется для лечения астении и снижения усталости мышц при интенсивных физических нагрузках [1]. Основным механизмом действия цитруллина при астении является активное участие молекулы в цикле мочевины, что способствует более интенсивной переработке и элиминации аммиачных эндотоксинов. Биосинтез аргинина из цитруллина является важным механизмом осуществления антиатерогенного и вазодилататорного эффектов цитруллина, так как вазодилататор оксид азота синтезируется в организме именно из аргинина [2]. Малат-анион в составе малата цитруллина не только повышает всасывание молекул цитруллина в желудочно-кишечном тракте (ЖКТ) и всасывание бикарбонат-аниона в почках [3], но и являет- ся промежуточном продуктом цикла Кребса.
Эффективность цитруллина малата была показана в рандомизированных клинических исследованиях [4–7].
С точки зрения постгеномной медицины, воздействие малата цитруллина на организм не может ограничиваться перечисленными выше механизмами. В рамках постегномной парадигмы молекула любого лекарственного средства «мимикрирует» под определенные метаболиты (вследствие наличия тех или иных сходств в химической структуре) и, связываясь с теми или иными белками протеома, осуществляет соответствующие данному лекарству эффекты (как позитивные, так и негативные), что и позволяет выявить хемореактомный анализ. Совокупность всей имеющейся для заданной молекулы информации о взаимодействии с белками протеома (профиль сродства) дает возможность сделать обоснованные выводы о ее потенциальных эффектах.
Цель настоящей работы – сравнительный анализ свойств цитруллина малата с использованием новейшего направления постгеномной фармакологии – хемореактомного моделирования. Анализ фармакологических «возможностей» химических структур цитруллина и малат-аниона также проведен на основе хемоинформационного подхода, т. е. сравнения химической структуры исследуемой молекулы со структурами миллионов других молекул, для которых молекулярно-фармакологические свойства известны. В ка- честве молекул сравнения были использованы мельдоний и ацетилкарнитин. Анализ проведен с использованием новейших технологий машинного обучения [8–10], разрабатываемых в научной школе академика РАН Ю.И. Журавлева и члена-корреспондента РАН К.В. Рудакова [8–13].
Материал и методы. Хемоинформатика – область исследований на стыке структурной химии, фармакологии и
биоинформатики, в которой взаимосвязи типа «химическая структура» – «свойство вещества» исследуются методами современной информатики. Особый подраздел хемоинформатики – хемореактомный анализ – направлен на оценку биологических активностей исследуемой молекулы. В настоящей работе проведен сравнительный хемореактомный анализ молекул цитруллина и яблочной кислоты (малат-аниона) в сравнении с контрольными молекулами – мельдонием и ацетилкарнитином (см. рисунок).
Для проведения хемоинформационного анализа был разработан новый математический метод, основанный на комбинаторной теории разрешимости [9–12]. Комбинаторная теория разрешимости, представляющая собой развитие
алгебраического подхода к задачам распознавания, является современным инструментом для исследования призна- ковых описаний объектов. При необходимости установления молекул, химическая структура которых схожа с заданной, объектами исследования являются хемографы. Хемограф (χ-граф) – особая разновидность графа (т. е. математического объекта, являющегося совокупностью множества вершин и множества ребер – связей между вершинами).
С использованием метрики Хэмминга, вычисляется функция расстояния между хемографами dχ, отражающая «хими- ческое расстояние» между двумя произвольными молекулами. Расстояние dχ используется для решения задачи поиска
молекул, структурно схожих с цитруллином и малат-анионом, а также для проведения хемореактомного анализа.
Хемореактомный анализ направлен на оценку биологических активностей, прежде всего моделирование профиля сходства с молекулами метаболома человека [14, 15] и профиля сродства исследуемой молекулярной структуры к различным белкам протеома человека [16–18]. После вычисления «химических расстояний» между исследуемой молекулой и всеми молекулами в базе данных для каждого из свойств, для которого необходимо рассчитать значения соответствующей биологической активности (константа связывания с белком, константа ингибирования фермента и др.), выбираются все схожие молекулы, для которых это свойство было измерено. Затем строится эмпирическая функция распределения значений константы и вычисляются оценки биологических свойств.
Результаты. С использованием метода хемоинформационного анализа были проведены сравнения химической структуры цитруллина и яблочной кислоты с молекулами в базе данных метаболома человека и с молекулами в базах данных лекарственных средств. В качестве модели метаболома человека использовались более 40 000 соединений, приведенных в базе данных метаболома человека (Human Metabolome Database, HMDB) [15]. Данные соединения включают большинство соединений, измеряемых в плазме крови человека, и также ряд лекарственных средств и их метаболитов.
Анализ схожих с цитруллином молекул указывает на такие возможные фармакологические эффекты цитруллина, как нейропротекторный, регенерирующий, успокаивающий, антифибринолитический, противовоспалительный, ан-тиконвульсантный, анальгетический, вазодилататорный. Некоторые из этих потенциальных эффектов цитруллина
были подтверждены в результате проведения хемореактомного моделирования молекулы цитрулллина (см. следую-
щий раздел).
Для сравнения: результаты хемоинформационного поиска молекул мельдония и ацетилкарнитина существенно отличаются от результатов хемоинформационного поиска молекул цитруллина и малата. Например, мельдоний был
схож только с бета-аланином и ГАМК2-подобными соединениями (например, бета-аминобутановая кислота и др.).
Ацетилкарнитин был структурно схож преимущественно с метаболитами карнитина.
Эффективность цитруллина малата была показана в рандомизированных клинических исследованиях [4–7].
С точки зрения постгеномной медицины, воздействие малата цитруллина на организм не может ограничиваться перечисленными выше механизмами. В рамках постегномной парадигмы молекула любого лекарственного средства «мимикрирует» под определенные метаболиты (вследствие наличия тех или иных сходств в химической структуре) и, связываясь с теми или иными белками протеома, осуществляет соответствующие данному лекарству эффекты (как позитивные, так и негативные), что и позволяет выявить хемореактомный анализ. Совокупность всей имеющейся для заданной молекулы информации о взаимодействии с белками протеома (профиль сродства) дает возможность сделать обоснованные выводы о ее потенциальных эффектах.
Цель настоящей работы – сравнительный анализ свойств цитруллина малата с использованием новейшего направления постгеномной фармакологии – хемореактомного моделирования. Анализ фармакологических «возможностей» химических структур цитруллина и малат-аниона также проведен на основе хемоинформационного подхода, т. е. сравнения химической структуры исследуемой молекулы со структурами миллионов других молекул, для которых молекулярно-фармакологические свойства известны. В ка- честве молекул сравнения были использованы мельдоний и ацетилкарнитин. Анализ проведен с использованием новейших технологий машинного обучения [8–10], разрабатываемых в научной школе академика РАН Ю.И. Журавлева и члена-корреспондента РАН К.В. Рудакова [8–13].
Материал и методы. Хемоинформатика – область исследований на стыке структурной химии, фармакологии и
биоинформатики, в которой взаимосвязи типа «химическая структура» – «свойство вещества» исследуются методами современной информатики. Особый подраздел хемоинформатики – хемореактомный анализ – направлен на оценку биологических активностей исследуемой молекулы. В настоящей работе проведен сравнительный хемореактомный анализ молекул цитруллина и яблочной кислоты (малат-аниона) в сравнении с контрольными молекулами – мельдонием и ацетилкарнитином (см. рисунок).
Для проведения хемоинформационного анализа был разработан новый математический метод, основанный на комбинаторной теории разрешимости [9–12]. Комбинаторная теория разрешимости, представляющая собой развитие
алгебраического подхода к задачам распознавания, является современным инструментом для исследования призна- ковых описаний объектов. При необходимости установления молекул, химическая структура которых схожа с заданной, объектами исследования являются хемографы. Хемограф (χ-граф) – особая разновидность графа (т. е. математического объекта, являющегося совокупностью множества вершин и множества ребер – связей между вершинами).
С использованием метрики Хэмминга, вычисляется функция расстояния между хемографами dχ, отражающая «хими- ческое расстояние» между двумя произвольными молекулами. Расстояние dχ используется для решения задачи поиска
молекул, структурно схожих с цитруллином и малат-анионом, а также для проведения хемореактомного анализа.
Хемореактомный анализ направлен на оценку биологических активностей, прежде всего моделирование профиля сходства с молекулами метаболома человека [14, 15] и профиля сродства исследуемой молекулярной структуры к различным белкам протеома человека [16–18]. После вычисления «химических расстояний» между исследуемой молекулой и всеми молекулами в базе данных для каждого из свойств, для которого необходимо рассчитать значения соответствующей биологической активности (константа связывания с белком, константа ингибирования фермента и др.), выбираются все схожие молекулы, для которых это свойство было измерено. Затем строится эмпирическая функция распределения значений константы и вычисляются оценки биологических свойств.
Результаты. С использованием метода хемоинформационного анализа были проведены сравнения химической структуры цитруллина и яблочной кислоты с молекулами в базе данных метаболома человека и с молекулами в базах данных лекарственных средств. В качестве модели метаболома человека использовались более 40 000 соединений, приведенных в базе данных метаболома человека (Human Metabolome Database, HMDB) [15]. Данные соединения включают большинство соединений, измеряемых в плазме крови человека, и также ряд лекарственных средств и их метаболитов.
Анализ схожих с цитруллином молекул указывает на такие возможные фармакологические эффекты цитруллина, как нейропротекторный, регенерирующий, успокаивающий, антифибринолитический, противовоспалительный, ан-тиконвульсантный, анальгетический, вазодилататорный. Некоторые из этих потенциальных эффектов цитруллина
были подтверждены в результате проведения хемореактомного моделирования молекулы цитрулллина (см. следую-
щий раздел).
Для сравнения: результаты хемоинформационного поиска молекул мельдония и ацетилкарнитина существенно отличаются от результатов хемоинформационного поиска молекул цитруллина и малата. Например, мельдоний был
схож только с бета-аланином и ГАМК2-подобными соединениями (например, бета-аминобутановая кислота и др.).
Ацетилкарнитин был структурно схож преимущественно с метаболитами карнитина.
Результаты хемореактомного
моделирования цитруллина и малата
моделирования цитруллина и малата
В ходе хемореактомного моделирования молекул цитруллина и малата были получены достоверные оценки более
2500 биологических активностей и проведено сравнение с контрольными молекулами – мельдонием и ацетилкарни- тином.
Анализ взаимодействия цитруллина с рецепторами различных нейротрансмиттеров указал на более выраженные (по сравнению с контрольными молекулами) антидепрессивные, анксиолитические и анальгетические свойства молекулы цитруллина. Данное заключение подтверждают, в частности, результаты хемореактомного моделирования
взаимодействия цитруллина с адренергическими, дофаминовыми, серотониновыми и другими видами рецепторов.
Моделирование продемонстрировало большее сродство цитруллина с α1-, а не с α2-адренорецепторами. Эти ад-
ренорецепторы в основном опосредуют сокращение гладкой мускулатуры, восприятие боли и отчасти – регуляцию
настроения. Нейромедиатор норадреналин имеет более высокое сродство к α1-рецепторам, нежели адреналин. Антагонисты α1- и α2-адренорецепторов используются в качестве антидепрессантов и гипотензивных средств [19, 20].
Дофаминовые рецепторы участвуют в процессах мотивации, внимания, обучения, тонкой моторной координации, модулирования нейроэндокринных сигналов. Недостаточная дофаминовая активность ассоциирована с гиперактивностью, дефицитом внимания, биполярными расстройствами, депрессивными состояниями.
Нормальная дофаминергическая активность – одно из условий, снижающих риск формирования алкогольной
зависимости [21]. Антагонисты дофаминовых рецепторов всех типов являются антипсихотическими средствами [22]. Хемореактомное моделирование показало, что молекула цитруллина в большей степени, чем контрольные
молекулы, может ингибировать транспортер дофамина DAT, который осуществляет обратный захват дофамина в
синапсах: так, для цитруллина константа ингибирования (Ki) составляет 314 нМ, для мельдония – 657 нМ, для аце-
тилкарнитина – 1125 нМ. Ингибирование транспортера DAT соответствует потенциальной дофаминергической ак-
тивности молекулы цитруллина.
Серотониновые рецепторы осуществляют биологические эффекты нейромедиатора и гормона серотонина
(5-гидрокситриптамин, 5-HT). Активация серотониновых рецепторов запускает внутриклеточные процессы, влияющие на активность других медиаторных систем: глутаматной, дофаминовой и ГАМКергической. Антагонисты рецепторов 5-HT используются как антипсихотики и антидепрессанты [23].
Хемореактомный анализ показал, что цитруллин может ингибировать белок-переносчик серотонина в большей
степени, чем контрольные молекулы: константа (К) сродства цитруллина к транспортеру серотонина была существенно ниже (360 нМ), чем мельдония (К>10000 нМ) и ацетилкарнитина (К=905 нМ). Напомним, что более низкое значение К обозначает большее сродство молекулы к рецептору. Поэтому эффекты цитруллина отчасти могут быть подобны эффектам селективных ингибиторов обратного захвата серотонина (СИОЗС). Средства из группы СИОЗС,
используемые в качестве антидепрессантов и анксиолитиков, ингибируют белок-переносчик серотонина, увеличивая таким образом уровень серотонина в синаптической щели [24]. Ингибирование цитруллином глутаматных рецепторов (в частности, метаботропного рецептора mGluR5) также будет приводить к усилению эффектов серотонина.
Ингибирование адренергических [25, 26] и глутаматных рецепторов на фоне стимулирования дофаминовой [27] и серотониновой [28] активности может способствовать формированию анальгетического эффекта. Действительно, моделирование экспериментальных неврологических эффектов цитруллина подтверждает этот вывод: по сравнению с
контрольными молекулами цитруллин характеризовался более выраженным анальгетическим действием (см. таблицу).
Результаты хемореактомного моделирования также указали на более выраженные противовоспалительные свойства молекулы цитруллина по сравнению с контрольными молекулами. Противовоспалительный эффект цитруллина обусловлен, по-видимому, модуляцией метаболизма простагландинов (ингибирование простагландин-синтазы циклооксигеназы 2 – ЦОГ2 – и 5-липоксигеназы) и подтверждается результатами моделирования экспериментальных эффектов (противовоспалительная активность в модели адъювантного артрита, модель отека и др.). Например, Ki ЦОГ2 составила для цитруллина 334 нМ, для мельдония >10 000 нМ и для ацетилкарнитина – 632 нМ.
2500 биологических активностей и проведено сравнение с контрольными молекулами – мельдонием и ацетилкарни- тином.
Анализ взаимодействия цитруллина с рецепторами различных нейротрансмиттеров указал на более выраженные (по сравнению с контрольными молекулами) антидепрессивные, анксиолитические и анальгетические свойства молекулы цитруллина. Данное заключение подтверждают, в частности, результаты хемореактомного моделирования
взаимодействия цитруллина с адренергическими, дофаминовыми, серотониновыми и другими видами рецепторов.
Моделирование продемонстрировало большее сродство цитруллина с α1-, а не с α2-адренорецепторами. Эти ад-
ренорецепторы в основном опосредуют сокращение гладкой мускулатуры, восприятие боли и отчасти – регуляцию
настроения. Нейромедиатор норадреналин имеет более высокое сродство к α1-рецепторам, нежели адреналин. Антагонисты α1- и α2-адренорецепторов используются в качестве антидепрессантов и гипотензивных средств [19, 20].
Дофаминовые рецепторы участвуют в процессах мотивации, внимания, обучения, тонкой моторной координации, модулирования нейроэндокринных сигналов. Недостаточная дофаминовая активность ассоциирована с гиперактивностью, дефицитом внимания, биполярными расстройствами, депрессивными состояниями.
Нормальная дофаминергическая активность – одно из условий, снижающих риск формирования алкогольной
зависимости [21]. Антагонисты дофаминовых рецепторов всех типов являются антипсихотическими средствами [22]. Хемореактомное моделирование показало, что молекула цитруллина в большей степени, чем контрольные
молекулы, может ингибировать транспортер дофамина DAT, который осуществляет обратный захват дофамина в
синапсах: так, для цитруллина константа ингибирования (Ki) составляет 314 нМ, для мельдония – 657 нМ, для аце-
тилкарнитина – 1125 нМ. Ингибирование транспортера DAT соответствует потенциальной дофаминергической ак-
тивности молекулы цитруллина.
Серотониновые рецепторы осуществляют биологические эффекты нейромедиатора и гормона серотонина
(5-гидрокситриптамин, 5-HT). Активация серотониновых рецепторов запускает внутриклеточные процессы, влияющие на активность других медиаторных систем: глутаматной, дофаминовой и ГАМКергической. Антагонисты рецепторов 5-HT используются как антипсихотики и антидепрессанты [23].
Хемореактомный анализ показал, что цитруллин может ингибировать белок-переносчик серотонина в большей
степени, чем контрольные молекулы: константа (К) сродства цитруллина к транспортеру серотонина была существенно ниже (360 нМ), чем мельдония (К>10000 нМ) и ацетилкарнитина (К=905 нМ). Напомним, что более низкое значение К обозначает большее сродство молекулы к рецептору. Поэтому эффекты цитруллина отчасти могут быть подобны эффектам селективных ингибиторов обратного захвата серотонина (СИОЗС). Средства из группы СИОЗС,
используемые в качестве антидепрессантов и анксиолитиков, ингибируют белок-переносчик серотонина, увеличивая таким образом уровень серотонина в синаптической щели [24]. Ингибирование цитруллином глутаматных рецепторов (в частности, метаботропного рецептора mGluR5) также будет приводить к усилению эффектов серотонина.
Ингибирование адренергических [25, 26] и глутаматных рецепторов на фоне стимулирования дофаминовой [27] и серотониновой [28] активности может способствовать формированию анальгетического эффекта. Действительно, моделирование экспериментальных неврологических эффектов цитруллина подтверждает этот вывод: по сравнению с
контрольными молекулами цитруллин характеризовался более выраженным анальгетическим действием (см. таблицу).
Результаты хемореактомного моделирования также указали на более выраженные противовоспалительные свойства молекулы цитруллина по сравнению с контрольными молекулами. Противовоспалительный эффект цитруллина обусловлен, по-видимому, модуляцией метаболизма простагландинов (ингибирование простагландин-синтазы циклооксигеназы 2 – ЦОГ2 – и 5-липоксигеназы) и подтверждается результатами моделирования экспериментальных эффектов (противовоспалительная активность в модели адъювантного артрита, модель отека и др.). Например, Ki ЦОГ2 составила для цитруллина 334 нМ, для мельдония >10 000 нМ и для ацетилкарнитина – 632 нМ.
Заметим, что с точки зрения фундаментальной биохимии цитруллина [2] существует еще один очень важный механизм осуществления противовоспалительного действия этой молекулы – посредством ингибирования ферментов пептидиларгинин деаминаз. Этот механизм не противоречит осуществлению эффектов цитруллина посредством мо-
дуляции метаболизма простагландинов.
Пептидиларгинин деаминазы – кальций-зависимые ферменты, которые осуществляют биотрансформацию определенных остатков аргинина в белках в цитруллин. В частности, такая посттрансляционная модификация белков известна для основного белка миелина (MBP), стабилизирующих ДНК гистоновых белков, белков цитоскелета (фибрин, виментин, филлагрин) и др. Ингибирование пептидиларгинин деаминаз способствует уменьшению воспаления при рассеянном склерозе [29], гиперактивности нейтрофилов и повреждении эндотелия [30]. Цитруллин, связываясь с активным центром ферментов пептидиларгинин деаминаз, будет проявлять подобное противовоспалительное действие.
Результаты хемореактомного моделирования также указывают на позитивные гемодинамические свойства молекулы цитруллина, проявляющиеся как антикоагулянтный, антивазопрессорный, гипогликемический, антиги-перхолестеринемический эффекты. Анализ показал, что антикоагулянтное действие может быть связано с ингибирова-
нием фактора свертывания X, а ингибирование вазопрессорной реакции – с вытеснением аргинин-вазопрессина из
V1B-рецептора вазопрессина. В соответствии с результатами анализа гипогликемическая активность связана с акти-
вацией рецептора PPAR-гамма, который является известным таргетным белком для гипогликемических средств из
группы тиазолидиндионов (росиглитазон и др.). Гипогликемическая активность цитруллина также будет способствовать снижению гиперхолестеринемии.
Оценка фармакокинетических свойств исследуемых молекул показывает, что цитруллин характеризуется более интенсивным всасыванием, чем молекулы сравнения. В то же время метаболическая стабильность цитруллина в мик-
росомах печени и по отношению к глюкоуронизации выше, чем исследованных контрольных молекул.
Хемореактомный анализ также позволил установить, что важной особенностью молекулы цитруллина являются
слабовыраженный антибактериальный эффект в отношении золотистого стафилококка, пневмококка, противогрибковая активность. Хотя предполагаемые эффекты цитруллина были достаточно слабы (минимальные ингибирующие концентрации – около 5–20 мкг/мл), эффекты молекул сравнения были еще слабее. Антибактериальный эффект цитруллина может быть важен для более интенсивного восстановления пациентов с постинфекционной астенией, которая длится от 2 до 4 нед и наблюдается по меньшей мере у 30% пациентов [31]. Например, сила мышечного сокращения у пациентов, перенесших грипп, снижается на 15%, а аэробная производительность мышц – на 25% [32].
Хемореактомный анализ молекулы яблочной кислоты (малат-анион) показал, что эффекты малата синергичны эффектам цитруллина. Как и цитруллин, малат-анион может характеризоваться анксиолитическими, противовоспалительными, антикоагулянтными, антивазопрессорными, гипогликемическими и антигиперхолестеринемическими свойствами.
Анксиолитический эффект малат-аниона обусловлен, в частности, ингибированием обратного захвата серотонина, а также бензодиазепинового и глутаматных рецепторов. Противовоспалительный эффект ассоциирован с ингибированием простагландин-G/H-синтазы 2 и 5-липоксигеназы, антикоагулянтный – с ингибированием рецепторов тромбоцитов (гликопротеинов мембраны тромбоцитов GPIa, GPIIa и др.). Эти эффекты были более выражены именно для малат-аниона, а не для молекул сравнения.
дуляции метаболизма простагландинов.
Пептидиларгинин деаминазы – кальций-зависимые ферменты, которые осуществляют биотрансформацию определенных остатков аргинина в белках в цитруллин. В частности, такая посттрансляционная модификация белков известна для основного белка миелина (MBP), стабилизирующих ДНК гистоновых белков, белков цитоскелета (фибрин, виментин, филлагрин) и др. Ингибирование пептидиларгинин деаминаз способствует уменьшению воспаления при рассеянном склерозе [29], гиперактивности нейтрофилов и повреждении эндотелия [30]. Цитруллин, связываясь с активным центром ферментов пептидиларгинин деаминаз, будет проявлять подобное противовоспалительное действие.
Результаты хемореактомного моделирования также указывают на позитивные гемодинамические свойства молекулы цитруллина, проявляющиеся как антикоагулянтный, антивазопрессорный, гипогликемический, антиги-перхолестеринемический эффекты. Анализ показал, что антикоагулянтное действие может быть связано с ингибирова-
нием фактора свертывания X, а ингибирование вазопрессорной реакции – с вытеснением аргинин-вазопрессина из
V1B-рецептора вазопрессина. В соответствии с результатами анализа гипогликемическая активность связана с акти-
вацией рецептора PPAR-гамма, который является известным таргетным белком для гипогликемических средств из
группы тиазолидиндионов (росиглитазон и др.). Гипогликемическая активность цитруллина также будет способствовать снижению гиперхолестеринемии.
Оценка фармакокинетических свойств исследуемых молекул показывает, что цитруллин характеризуется более интенсивным всасыванием, чем молекулы сравнения. В то же время метаболическая стабильность цитруллина в мик-
росомах печени и по отношению к глюкоуронизации выше, чем исследованных контрольных молекул.
Хемореактомный анализ также позволил установить, что важной особенностью молекулы цитруллина являются
слабовыраженный антибактериальный эффект в отношении золотистого стафилококка, пневмококка, противогрибковая активность. Хотя предполагаемые эффекты цитруллина были достаточно слабы (минимальные ингибирующие концентрации – около 5–20 мкг/мл), эффекты молекул сравнения были еще слабее. Антибактериальный эффект цитруллина может быть важен для более интенсивного восстановления пациентов с постинфекционной астенией, которая длится от 2 до 4 нед и наблюдается по меньшей мере у 30% пациентов [31]. Например, сила мышечного сокращения у пациентов, перенесших грипп, снижается на 15%, а аэробная производительность мышц – на 25% [32].
Хемореактомный анализ молекулы яблочной кислоты (малат-анион) показал, что эффекты малата синергичны эффектам цитруллина. Как и цитруллин, малат-анион может характеризоваться анксиолитическими, противовоспалительными, антикоагулянтными, антивазопрессорными, гипогликемическими и антигиперхолестеринемическими свойствами.
Анксиолитический эффект малат-аниона обусловлен, в частности, ингибированием обратного захвата серотонина, а также бензодиазепинового и глутаматных рецепторов. Противовоспалительный эффект ассоциирован с ингибированием простагландин-G/H-синтазы 2 и 5-липоксигеназы, антикоагулянтный – с ингибированием рецепторов тромбоцитов (гликопротеинов мембраны тромбоцитов GPIa, GPIIa и др.). Эти эффекты были более выражены именно для малат-аниона, а не для молекул сравнения.
Заключение.
Цитруллина малат (действующее вещество препарата Стимол) представляет собой своего рода фармакологическую модернизацию (upgrade) молекулы цитруллина. Цитруллина малат способствует обезвреживанию аммиачных эндотоксинов за счет участия в цикле мочевины и необходим для биосинтеза аргинина. Малат-анион в составе
малата цитруллина значимо повышает всасывание молекул цитруллина в ЖКТ независимо от кислотности желудка.
Цитруллина малат улучшает всасывание бикарбонат-аниона в почках, что способствует преодолению ацидоза. Малат-анион является промежуточным продуктом цикла Кребса, т. е. потенцирует выработку АТФ. Результаты хемореактом-
ного моделирования указывают на выраженные антидепрессивные, анксиолитические, противовоспалительные свойства
цитруллина малата, что может вносить существенный вклад в развитие противоастенического и детоксикационного дей-
ствия стимола. Молекула цитруллина малата также может проявлять антикоагулянтный, антивазопрессорный,
гипогликемический, антигиперхолестеринемический и антибактериальный эффекты. Благодаря этим потенциальным
свойствам цитруллина малат может улучшать восстановление пациентов после астении или интенсивных физических
нагрузок, позволяет быстрее и эффективнее справляться с азотистыми токсинами по сравнению с контрольными мо-
лекулами (мельдоний, ацетилкарнитин).
малата цитруллина значимо повышает всасывание молекул цитруллина в ЖКТ независимо от кислотности желудка.
Цитруллина малат улучшает всасывание бикарбонат-аниона в почках, что способствует преодолению ацидоза. Малат-анион является промежуточным продуктом цикла Кребса, т. е. потенцирует выработку АТФ. Результаты хемореактом-
ного моделирования указывают на выраженные антидепрессивные, анксиолитические, противовоспалительные свойства
цитруллина малата, что может вносить существенный вклад в развитие противоастенического и детоксикационного дей-
ствия стимола. Молекула цитруллина малата также может проявлять антикоагулянтный, антивазопрессорный,
гипогликемический, антигиперхолестеринемический и антибактериальный эффекты. Благодаря этим потенциальным
свойствам цитруллина малат может улучшать восстановление пациентов после астении или интенсивных физических
нагрузок, позволяет быстрее и эффективнее справляться с азотистыми токсинами по сравнению с контрольными мо-
лекулами (мельдоний, ацетилкарнитин).
Поступила 18.11.2016
Данный материал опубликован при поддержке ООО «БИОКОДЕКС». Мнение автора может не совпадать с точкой зре-
ния ООО «БИОКОДЕКС».
Данный материал опубликован при поддержке ООО «БИОКОДЕКС». Мнение автора может не совпадать с точкой зре-
ния ООО «БИОКОДЕКС».
Литература:
1. Bendahan D, Mattei JP, Ghattas B, et al. Citrulline/malate promotes aerobic energy production in human exercising muscle. Br J Sports Med. 2002 Aug;36(4):282-9.
2. Cox M, Lehninger AL, Nelson DR. Lehninger principles of biochemistry. 3rd edition. New York: Worth Publishers; 2000.
3. Callis A, Magnan de Bornier B, Serrano JJ, et al. Activity of citrulline malate on acid-base balance and blood ammonia and amino acid levels. Study in the animal and in man.
Arzneimittelforschung. 1991 Jun;41(6):660-3.
4. Jensen A, Glenn J, Stone M, Gray M. Effect Of Acute Citrulline-malate Supplementation On Muscular Power: 896 Board #212 June 1,
3: 30 PM – 5: 00 PM. Med Sci Sports Exerc. 2016 May;48(5 Suppl 1):252. doi: 10.1249/01.mss.0000485759.38927.5f.
5. Glenn JM, Gray M, Jensen A, et al. Acute Citrulline-Malate Supplementation Increases Strength and Endurance During Isokinetic Exercise in Masters-Aged Female Tennis Players: 894 Board #210 June 1, 3: 30 PM – 5: 00 PM. Med Sci Sports Exerc. 2016 May;48(5 Suppl 1):251-2. doi: 10.1249/01.mss.0000485757. 31118.50.
6. Glenn JM, Gray M, Jensen A, et al. Acute citrulline-malate supplementation improves maximal strength and anaerobic power in female, masters athletes tennis players. Eur J Sport Sci. 2016 Nov;16(8):1095-103. doi: 10.1080/17461391.2016.1158321. Epub 2016 Mar 28.
7. Cunniffe B, Papageorgiou M, O'Brien B, et al. Acute Citrulline-Malate Supplementation and High-Intensity Cycling Performance. J Strength Cond Res. 2016 Sep;30(9):2638-47.
doi: 10.1519/JSC.0000000000001338.
8. Torshin IYu, Rudakov KV. 2014. On the application of the combinatorial theory of solvability to the analysis of chemographs. Part 1: Fundamentals of modern chemical bonding
theory and the concept of the chemograph. Pattern Recognit. Image Anal. 2014;24(1):11-23.
9. Torshin IYu, Rudakov KV. On the application of the combinatorial theory of solvability to the analysis of chemographs: Part 2. Local completeness of invariants of chemographs in view of the combinatorial theory of solvability. Pattern Recognit. Image Anal. 2014;24(2):196-208.
10. Рудаков КВ, Торшин ИЮ. Об отборе ин- формативных значений признаков на базе критериев разрешимости в задаче распознавания вторичной структуры белка. ДАН. 2011;441(1):1-5. [Rudakov KV, Torshin IYu. On the selection of informative characteristic values on the basis of criteria of solvability in the problem of protein secondary structure recognition. DAN. 2011;441(1):1-5. (In Russ.)].
11. Torshin IYu. On solvability, regularity, and locality of the problem of genome annotation. Pattern Recognition and Image Analysis. 2010;20(3):386-95.
12. Журавлёв ЮИ, Рудаков КВ, Торшин ИЮ. Алгебраические критерии локальной разре- шимости и регулярности как инструмент исследования морфологии аминокислотных последовательностей. Труды МФТИ. 2011;3(4):67-76. [Zhuravlev YuI, Rudakov KV, Torshin IYu. Algebraic criteria for local solvability and regularity as a tool to investigate the morphology of amino acid sequences. Trudy MFTI. 2011;3(4):67-76. (In Russ.)].
13. Журавлев ЮИ. Об алгебраическом под- ходе к решению задач распознавания или классификации. Проблемы кибернетики. 1978;(33):5-68. [Zhuravlev YuI. About algebraic approach to solving the problems of recognition or classification. Problemy kibernetiki. 1978;(33):5-68. (In Russ.)].
14. Bolton E, Wang Y, Thiessen PA, Bryant SH. PubChem: Integrated Platform of Small Molecules and Biological Activities. In: Annual Reports in Computational Chemistry. Volume 4. Washington, DC: American Chemical Society; 2008.
15. Wishart DS, Tzur D, Knox C, et al. HMDB: the Human Metabolome Database. Nucleic Acids Res. 2007 Jan;35(Database issue):D521-6.
16. Torshin IYu. Bioinformatics in the post-genomic era: sensing the change from molecular genetics to personalized medicine. New-York: Nova Biomedical Books; 2009.
17. Торшин ИЮ, Громова ОА. Экспертный анализ данных в молекулярной фармакологии. Москва: Издательство МЦНМО; 2012.
768 с. [Torshin IYu, Gromova OA. Ekspertnyi analiz dannykh v molekulyarnoi farmakologii [Expert data analysis in molecular pharmacology]. Moscow: Izdatel'stvo MTsNMO; 2012. 768 p.].
18. Torshin IYu. Bioinformatics in the post-genomic era: physiology and medicine. New-York: Nova Biomedical Books; 2007.
19. Piascik MT, Perez DM. Alpha1-adrenergic receptors: new insights and directions. J Pharmacol Exp Ther. 2001 Aug;298(2):403-10.
20. Boron WF, Boulpaep EL. Medical Physiology: A Cellular and Molecular Approach.N.-Y.: Saunders; 2012. 1352 p.
21. Carboni E, Tanda GL, Frau R, Di Chiara G. Blockade of the noradrenaline carrier increases extracellular dopamine concentrations in the prefrontal cortex: evidence that dopamine is taken up in vivo by noradrenergic terminals. J Neurochem. 1990 Sep;55(3): 1067-70.
22. Girault JA, Greengard P. The neurobiology of dopamine signaling. Arch Neurol. 2004 May;61(5):641-4.
23. Nelson DL. 5-HT5 receptors. Curr Drug Targets CNS Neurol Disord. 2004 Feb;3(1):53-8.
24. Tham A, Jonsson U, Andersson G, et al. Efficacy and tolerability of antidepressants in people aged 65 years or older with major depressive disorder – A systematic review and a meta-analysis. J Affect Disord. 2016 Nov 15;205:1-12. doi: 10.1016/j.jad.2016.06.013. Epub 2016 Jun 18.
25. Park CH, Yong A, Lee SH. Involvement of selective alpha-2 adrenoreceptor in sympathetically maintained pain. J Korean Neurosurg Soc. 2010 Jun;47(6):420-3. doi: 10.3340/jkns.2010.47.6.420. Epub 2010 Jun 30.
26. Harkanen L, Halonen J, Selander T, Kokki H. Beta-adrenergic antagonists during general anesthesia reduced postoperative pain: a systematic review and a meta-analysis of randomized controlled trials. J Anesth. 2015 Dec;29(6):934-43. doi: 10.1007/s00540-015- 2041-9. Epub 2015 Jul 10.
27. Wood PB. Role of central dopamine in pain and analgesia. Expert Rev Neurother. 2008 May;8(5):781-97. doi: 10.1586/14737175. 8.5.781.
28. Crisp T, Stafinsky JL, Spanos LJ, et al. Analgesic effects of serotonin and receptorselective serotonin agonists in the rat spinal cord. Gen Pharmacol. 1991;22(2):247-51.
29. Moscarello MA, Lei H, Mastronardi FG, et al. Inhibition of peptidyl-arginine deiminases reverses protein-hypercitrullination and disease in mouse models of multiple sclerosis. Dis Model Mech. 2013 Mar;6(2):467-78. doi: 10.1242/dmm.010520. Epub 2012 Nov 1.
30. Knight JS, Subramanian V, O'Dell AA, et al. Peptidylarginine deiminase inhibition disrupts NET formation and protects against kidney, skin and vascular disease in lupus-prone MRL/lpr mice. Ann Rheum Dis. 2015 Dec;74(12):2199-206. doi: 10.1136/annrheumdis- 2014-205365. Epub 2014 Aug 7.
31. Harvey JM, Broderick G, Bowie A, et al. Tracking post-infectious fatigue in clinic using routine Lab tests. BMC Pediatr. 2016 Apr 26;16:54. doi: 10.1186/s12887-016-0596-8.
32. Astrom E, Friman G, Pilstrom L. Effects of viral and mycoplasma infections on ultrastructure and enzyme activities in human skeletal muscle. Acta Pathol Microbiol Scand A. 1976 Mar;84(2):113-22.
1. Bendahan D, Mattei JP, Ghattas B, et al. Citrulline/malate promotes aerobic energy production in human exercising muscle. Br J Sports Med. 2002 Aug;36(4):282-9.
2. Cox M, Lehninger AL, Nelson DR. Lehninger principles of biochemistry. 3rd edition. New York: Worth Publishers; 2000.
3. Callis A, Magnan de Bornier B, Serrano JJ, et al. Activity of citrulline malate on acid-base balance and blood ammonia and amino acid levels. Study in the animal and in man.
Arzneimittelforschung. 1991 Jun;41(6):660-3.
4. Jensen A, Glenn J, Stone M, Gray M. Effect Of Acute Citrulline-malate Supplementation On Muscular Power: 896 Board #212 June 1,
3: 30 PM – 5: 00 PM. Med Sci Sports Exerc. 2016 May;48(5 Suppl 1):252. doi: 10.1249/01.mss.0000485759.38927.5f.
5. Glenn JM, Gray M, Jensen A, et al. Acute Citrulline-Malate Supplementation Increases Strength and Endurance During Isokinetic Exercise in Masters-Aged Female Tennis Players: 894 Board #210 June 1, 3: 30 PM – 5: 00 PM. Med Sci Sports Exerc. 2016 May;48(5 Suppl 1):251-2. doi: 10.1249/01.mss.0000485757. 31118.50.
6. Glenn JM, Gray M, Jensen A, et al. Acute citrulline-malate supplementation improves maximal strength and anaerobic power in female, masters athletes tennis players. Eur J Sport Sci. 2016 Nov;16(8):1095-103. doi: 10.1080/17461391.2016.1158321. Epub 2016 Mar 28.
7. Cunniffe B, Papageorgiou M, O'Brien B, et al. Acute Citrulline-Malate Supplementation and High-Intensity Cycling Performance. J Strength Cond Res. 2016 Sep;30(9):2638-47.
doi: 10.1519/JSC.0000000000001338.
8. Torshin IYu, Rudakov KV. 2014. On the application of the combinatorial theory of solvability to the analysis of chemographs. Part 1: Fundamentals of modern chemical bonding
theory and the concept of the chemograph. Pattern Recognit. Image Anal. 2014;24(1):11-23.
9. Torshin IYu, Rudakov KV. On the application of the combinatorial theory of solvability to the analysis of chemographs: Part 2. Local completeness of invariants of chemographs in view of the combinatorial theory of solvability. Pattern Recognit. Image Anal. 2014;24(2):196-208.
10. Рудаков КВ, Торшин ИЮ. Об отборе ин- формативных значений признаков на базе критериев разрешимости в задаче распознавания вторичной структуры белка. ДАН. 2011;441(1):1-5. [Rudakov KV, Torshin IYu. On the selection of informative characteristic values on the basis of criteria of solvability in the problem of protein secondary structure recognition. DAN. 2011;441(1):1-5. (In Russ.)].
11. Torshin IYu. On solvability, regularity, and locality of the problem of genome annotation. Pattern Recognition and Image Analysis. 2010;20(3):386-95.
12. Журавлёв ЮИ, Рудаков КВ, Торшин ИЮ. Алгебраические критерии локальной разре- шимости и регулярности как инструмент исследования морфологии аминокислотных последовательностей. Труды МФТИ. 2011;3(4):67-76. [Zhuravlev YuI, Rudakov KV, Torshin IYu. Algebraic criteria for local solvability and regularity as a tool to investigate the morphology of amino acid sequences. Trudy MFTI. 2011;3(4):67-76. (In Russ.)].
13. Журавлев ЮИ. Об алгебраическом под- ходе к решению задач распознавания или классификации. Проблемы кибернетики. 1978;(33):5-68. [Zhuravlev YuI. About algebraic approach to solving the problems of recognition or classification. Problemy kibernetiki. 1978;(33):5-68. (In Russ.)].
14. Bolton E, Wang Y, Thiessen PA, Bryant SH. PubChem: Integrated Platform of Small Molecules and Biological Activities. In: Annual Reports in Computational Chemistry. Volume 4. Washington, DC: American Chemical Society; 2008.
15. Wishart DS, Tzur D, Knox C, et al. HMDB: the Human Metabolome Database. Nucleic Acids Res. 2007 Jan;35(Database issue):D521-6.
16. Torshin IYu. Bioinformatics in the post-genomic era: sensing the change from molecular genetics to personalized medicine. New-York: Nova Biomedical Books; 2009.
17. Торшин ИЮ, Громова ОА. Экспертный анализ данных в молекулярной фармакологии. Москва: Издательство МЦНМО; 2012.
768 с. [Torshin IYu, Gromova OA. Ekspertnyi analiz dannykh v molekulyarnoi farmakologii [Expert data analysis in molecular pharmacology]. Moscow: Izdatel'stvo MTsNMO; 2012. 768 p.].
18. Torshin IYu. Bioinformatics in the post-genomic era: physiology and medicine. New-York: Nova Biomedical Books; 2007.
19. Piascik MT, Perez DM. Alpha1-adrenergic receptors: new insights and directions. J Pharmacol Exp Ther. 2001 Aug;298(2):403-10.
20. Boron WF, Boulpaep EL. Medical Physiology: A Cellular and Molecular Approach.N.-Y.: Saunders; 2012. 1352 p.
21. Carboni E, Tanda GL, Frau R, Di Chiara G. Blockade of the noradrenaline carrier increases extracellular dopamine concentrations in the prefrontal cortex: evidence that dopamine is taken up in vivo by noradrenergic terminals. J Neurochem. 1990 Sep;55(3): 1067-70.
22. Girault JA, Greengard P. The neurobiology of dopamine signaling. Arch Neurol. 2004 May;61(5):641-4.
23. Nelson DL. 5-HT5 receptors. Curr Drug Targets CNS Neurol Disord. 2004 Feb;3(1):53-8.
24. Tham A, Jonsson U, Andersson G, et al. Efficacy and tolerability of antidepressants in people aged 65 years or older with major depressive disorder – A systematic review and a meta-analysis. J Affect Disord. 2016 Nov 15;205:1-12. doi: 10.1016/j.jad.2016.06.013. Epub 2016 Jun 18.
25. Park CH, Yong A, Lee SH. Involvement of selective alpha-2 adrenoreceptor in sympathetically maintained pain. J Korean Neurosurg Soc. 2010 Jun;47(6):420-3. doi: 10.3340/jkns.2010.47.6.420. Epub 2010 Jun 30.
26. Harkanen L, Halonen J, Selander T, Kokki H. Beta-adrenergic antagonists during general anesthesia reduced postoperative pain: a systematic review and a meta-analysis of randomized controlled trials. J Anesth. 2015 Dec;29(6):934-43. doi: 10.1007/s00540-015- 2041-9. Epub 2015 Jul 10.
27. Wood PB. Role of central dopamine in pain and analgesia. Expert Rev Neurother. 2008 May;8(5):781-97. doi: 10.1586/14737175. 8.5.781.
28. Crisp T, Stafinsky JL, Spanos LJ, et al. Analgesic effects of serotonin and receptorselective serotonin agonists in the rat spinal cord. Gen Pharmacol. 1991;22(2):247-51.
29. Moscarello MA, Lei H, Mastronardi FG, et al. Inhibition of peptidyl-arginine deiminases reverses protein-hypercitrullination and disease in mouse models of multiple sclerosis. Dis Model Mech. 2013 Mar;6(2):467-78. doi: 10.1242/dmm.010520. Epub 2012 Nov 1.
30. Knight JS, Subramanian V, O'Dell AA, et al. Peptidylarginine deiminase inhibition disrupts NET formation and protects against kidney, skin and vascular disease in lupus-prone MRL/lpr mice. Ann Rheum Dis. 2015 Dec;74(12):2199-206. doi: 10.1136/annrheumdis- 2014-205365. Epub 2014 Aug 7.
31. Harvey JM, Broderick G, Bowie A, et al. Tracking post-infectious fatigue in clinic using routine Lab tests. BMC Pediatr. 2016 Apr 26;16:54. doi: 10.1186/s12887-016-0596-8.
32. Astrom E, Friman G, Pilstrom L. Effects of viral and mycoplasma infections on ultrastructure and enzyme activities in human skeletal muscle. Acta Pathol Microbiol Scand A. 1976 Mar;84(2):113-22.